D. Yu. Ryazantsev, E. M. Chudinova, L. Yu. Kokaeva, S. N. Elansky, P. N. Balabko, G. L. Belova, S. K. Zavriev
De phytopathogene Pilz Colletotrichum coccodes verursaacht geféierlech Krankheeten a Gromperen an Tomaten bekannt als Anthracnose a Knoll schwaarze Fleck. Duerch morphologesch Charakteristiken si se dacks schwéier z'ënnerscheeden vu Krankheeten, déi duerch aner Mikroorganismen verursaacht ginn; op gréng Tomaten Uebst, kann d'Krankheet asymptomatesch sinn, manifestéiert sech nëmmen op reife roude Friichten. Fir séier a präzis Diagnos vum Pathogen gëtt en Echtzäit PCR Test System ugebueden. Fir en Testesystem z'entwéckelen, gouf d'Nukleotidsequenz vum Glyceroltriphosphat-Dehydrogenase-Gen vu 45 C festgeluecht. Coccodes Stämme isoléiert aus Grompereknollen a verschiddene Regioune vu Russland.
Baséierend op d'Resultater kritt an Analyse vun ähnlechen Message vun aneren Aarten, déi an der GenBank Datebank verfügbar sinn, goufen Speziespezifesch Primer a Sonde fir C. coccodes entwéckelt. Fir d'Spezifizitéit vum erstallten Testesystem ze kontrolléieren, gouf PCR mat DNA isoléiert aus reng Kulturen aus 15 verschiddenen Aarte vu parasitären a saprotrophesche Pilze mat Tomaten a Grompereplanze (Fusarium oxysporum, F. verticillium, Phomopsis phaseoli, Alternaria alternata, Helminthosporium solani, Colletotrichum coccodes Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Helminthosporium solani, Phomopsis phaseoli, Neonectria radicicola, Rhizoctonia solani, Penicillium sp., Cladosporium fulvum, C. cladosporioides). D'Präsenz vu Colletotrichum coccodes DNA gouf bei engem Schwellenzyklus vun 20-27 festgeluecht, während aner Spezies no 40 Zyklen festgestallt goufen oder net festgestallt goufen. Den Test System mécht et méiglech zouverlässeg C. coccodes DNA Konzentratioune méi wéi 0.01 ng / mm3 an der analyséierter PCR Mëschung z'entdecken. Mat Hëllef vum entwéckelten Testsystem gouf d'Präsenz vu C. coccodes an Tomateblieder mat Symptomer vu Pilzkrankheeten an a Grompereknollen ouni extern Symptomer vun der Krankheet ënnersicht. Blieder mat Symptomer vu Pilzinfektioun goufen aus zwee verschiddene Felder am Krasnodar Territoire gesammelt, Knollen - vu Felder an de Kostroma, Moskau, Kaluga, Nizhny Novgorod Regiounen. Een Tomateblatt mat C. coccodes DNA gouf am Krasnodar Territoire fonnt; eng bedeitend Präsenz vun DNA vun dësem Pathogen gouf a 5 Proben vu Knollen entdeckt, déi an de Kostroma, Moskau, Kaluga Regiounen ugebaut goufen.
Aféierung
Champignone vun der Gattung Colletotrichum si geféierlech Phytopathogenen, déi Cerealien, Geméis, Kraider, méijähreg Uebst a Berryplanzen beaflossen. Eng vun den allgemenge Spezies vun dëser Gattung, Colletotrichum coccodes (Wallr).
Hughes, ass de verursaache Agent vun Anthracnose a schwaarze Fleck vu Gromperen an Tomaten, a verursaacht Krankheete vun enger Zuel vun anere Planzen aus der Solanaceae Famill, inkl. Unkraut (Dillard, 1992). C. Coccodes infizéiert all ënnerierdesch Deeler vun der Planz, Stammbasen, Blieder an Uebst (Andrivon et al., 1998; Johnson, 1994). Op der Schuel vun infizéierte Grompereknollen gëtt d'Entwécklung vu groe Flecken mat ondäitlech ausgeprägte Kante beobachtet, op deene schwaarz Punkte vu Sporulatioun a Mikrosklerotie kloer ze gesinn sinn. Während der Lagerung kënnen Geschwëster mat erweechtem Inhalt am Pulp vu Knollen entstoen, d.h. d'Krankheet kënnt an d'Anthracnose Phase, déi awer extrem seelen ass.
Zur selwechter Zäit sinn d'Symptomer vun Anthracnose (Hautgeschwéier mat klenge schwaarze Punkten) typesch op Tomaten Uebst. Op Blieder erschéngen d'Symptomer vu C. coccodes als donkel brong Flecken, meeschtens grenzt mat gielem Tissu (Johnson, 1994).
D'Entwécklung vu schwaarze Fleck op de Knollen verwinnt hir Erscheinung, wat besonnesch ausgesprochen gëtt beim wäschen rout gewielte Grompere. Peel-Peeling féiert zu iwwerschësseg Verdampfung a verstäerkte Späicherverloschter (Hunger and McIntyre, 1979). Schied un aner Planzorganer féiert zum Verloscht vun der Rendement, déi am oppenen an zouene Buedem notéiert gouf (Johnson, 1994; Tsror et al., 1999). Krankheeten, déi duerch C. Coccodes verursaacht ginn, sinn heefeg a bal alle Grompereproduzéierende Regioune vun der Welt, och a Russland (Leesa, Hilton, 2003; Belov et al, 2018). D'Kontroll vun dëse Krankheeten ass schwéier wéinst der net genuch Effizienz vun existente Fungiziden géint C. Coccoden an dem Mangel u resistente Varietéiten (Read, Hide, 1995).
De C. coccodes Inokulum kann a Saatknollen bestoen (Liesen, Verstoppen, 1988; Johnson et al., 1997), Tomatensomen (Ben-Daniel et al., 2010), iwwerliewe laang am Buedem, op Planzenreschter (Dillard, 1990 ; Dillard, Cobb, 1993) an a Onkraut (Raid, Pennypacker, 1987). D'Wierker vun enger Zuel vun Autoren (Read, Hide, 1988; Barkdoll, Davis, 1992; Johnson et al., 1997; Dillard, Cobb, 1993) hu gewisen datt d'Entwécklung vun der Krankheet an de Gromperen an Tomaten gréisstendeels vun der Präsenz vum Impfstoff am Som ofhänkt. Buedem. Dofir, fir d'Verloschter aus der Krankheet ze minimiséieren, ass et néideg ze diagnostizéieren (och quantitativ) d'Propagele vum Pilz am Sommaterial, am Buedem, an de Somkartoffelknollen an Tomatenkäre geluecht fir ze späicheren. Morphologesch Diagnostik am Buedem a Planzmaterial ka just duerch d'Präsenz vun der Mikrosklerotie ausgefouert ginn, déi awer och an aneren Aarte vu Pilze fonnt ginn.
D'Symptomer op de Knollen sinn ganz ähnlech wéi de Sëlwer Scab verursaacht vum Pilz Helminthosporium solani. Isolatioun vu Colletotrichum coccodes an Helminthosporium solani an eng reng Kultur ass zimlech schwéier an dauert laang wéinst dem luesen Wuesstum op engem Nährstoffmedium. Fir séier Colletotrichum Coccodes z'identifizéieren, ass et néideg instrumental diagnostesch Methoden ze benotzen. Déi bequemst Method ass Polymerasekettenreaktioun (PCR) a seng Ännerung - Echtzäit PCR. Momentan gëtt en Testsystem entwéckelt vu britesche Fuerscher (Cullen et al., 2002) fir d'ITS1 Regioun vun rDNA an Europa an den USA benotzt. Seng Notzung huet gutt Resultater an der Analyse vu russeschen Isolate gewisen (Belov et al, 2018). Wéi och ëmmer, C. coccodes ass héich variabel a seng Detektioun aus enger eenzeger DNA Sequenz kann zu falschen negativen Resultater féieren. Fir eng méi zouverléisseg Diagnos ass d'Analyse fir verschidden Speziespezifesch DNA-Sequenzen erfuerderlech, an dofir hu mir en originellt Test-System entwéckelt deen d'Coccodes vun der Sequenz vum Glyceraldehyd-3-Phosphat-Dehydrogenase-Gen identifizéiere léisst.
Material a Methoden
Fir d'Effektivitéit an d'Spezifizitéit vun den erstallten Testsystemer ze beurteilen, hu mir reng Kulture vu 15 Arte vu Pilze isoléiert vun den Autoren aus kranke Probe vun Tomateblieder an Uebst, Grompereknollen (Tabell 1) benotzt. Fir Isolatioun hu mir Organer vu Planze mat Symptomer vu Pilzinfektioun geholl, net méi wéi een Organ pro Busch.
E Stéck vun engem Knoll mat enger Schuel, e Stéck vun enger Tomatenfruucht, an e betraffent Blat goufen ënner engem Binokularmikroskop plazéiert, wouropshin Mycel, Sporen oder e Stéck Tissu goufen an en Agarmedium (Wort Agar) an eng Petri Geriicht mat enger geschärfter dissektéierender Nol transferéiert. D'Isolate goufen op Agarschräg an de Reagenzglas bei 4 ° C gelagert.
Proben vun Tomateblieder mat Symptomer vu Pilzkrankheeten, déi fir d'Analyse geduecht waren, goufen direkt no der Sammlung (am Feld) an 70% Ethylalkohol geluecht, an deem se bis zu DNA Isolatioun gelagert goufen. Grompereknollen goufen an de Laboratoire geliwwert, geschielt (2 × 1 cm Stéck) vun hinnen, a gefruer bei -20 ° С. Gespäichert gefruer bis DNA Isolatioun.
Pure Kulturen vu Pilze fir DNA Isolatioun goufen a flëssegt Ierzebulli ugebaut. De Myselium vum Pilz gouf aus dem flëssege Medium erausgeholl, op Filterpabeier gedréchent, a flëssege Stéckstoff gefruer, homogeniséiert, an CTAB-Puffer incubéiert, mat Chloroform gereinegt, mat enger Mëschung aus Isopropanol an 0.5 M Kaliumacetat gefällt, zweemol mat 2% Alkohol gewäsch. Déi entstinn DNA gouf an deioniséiertem Waasser opgeléist a bei -70 ° С gelagert (Kutuzova et al., 20). DNA Konzentratioun gouf gemooss mat engem HS DNA Quantifizéierungskit fir duebelstrengend DNA op Qubit 2017 (Qiagen, Däitschland). Déi alkoholiséierter a gefruerene Proben goufen a flëssege Stickstoff trituréiert, duerno gouf DNA Extraktioun op déiselwecht Manéier gemaach wéi hei uewen beschriwwen (fir de Myselium vu reng Pilzkulturen).
Dësch 1. Urspronk vun de gebrauchte Pilzstämm
Champignon Numm | Planz, Uergel | Plaz vun der Auswiel |
---|---|---|
Colletotrichum coccodes 1, C. coccodes 2, C. coccodes 3, Ilyonectria crassa, Rhizoctonia solani | Gromper Knoll | Kostroma Regioun, Grompereknollen vun der 1. Feldgeneratioun, Zorten Red Scarlett |
Colletotrichum coccodes 4 | Grompereblat | Rep. Mari El, Yoshkar-Ola |
Helminthosporium solani | Gromper Knoll | Magadan Regioun, pos. Zelt, Grompereknollen |
Cladosporium fulvum | Tomateblat | Moskau Regioun, grouss fruucht Tomat |
Alternativaria Tomatophila | Tomaten Uebst | iwwerginn vum Personal vum Laboratoire vu Mykologie a Phytopathologie vum All-Russian Research Institute of Plant Protection |
Fusarium verticillium, Phomopsisphaseoli, Alternaria alternata, Phellinus ferrugineovelutinus, Stemphylium vesicarium, Cladosporium cladosporioides, Acrodontium luzulae, Penicillium sp. | Tomaten Uebst | Krasnodar Territoire, Krymsky Bezierk, Grad Crème |
Fusarium oxysporum | Weizenwurzel | Moskau Regioun |
Hinnen alleguer war op engem DTprime amplifier (DNA-Technology) gesuergt. Fir Hinnen alleguer, goufen originell Primer an eng Sonde fir déi Spezies-spezifesch Regioun vum Glyceroltriphosphat-Dehydrogenase-Gen benotzt: Forward Primer Coc70gdf –TCATGATATCATTTCTCTCACGGCA, Reverse Primer Coc280gdr - TACTTGAGCATGTAGGCCTGGGT1). D'Primer verstäerken eng 213 BP Regioun.
D'Reaktioun huet 50 NG vun der totaler DNA (bei der Analyse vun de Blieder an de Knollen) an 10 NG (bei der Analyse vun DNA vu reine Pilzkulturen). D'Reaktiounsmëschung (35 μl) gouf vun enger Paraffinschicht an zwee Deeler getrennt: den ënneschten (20 μl) enthält 2 μl vun 10 × Reaktiounsbuffer (750 mm Tris-HCl, pH 8.8; 200 mm (NH4) 2SO4; 25 mm MgCl2; 0.1% Tween- 20), 0.5 mm vun all Deoxynukleotid-Triphosphat, 7 pmol vun all Primer, a 4 pmol vun enger hydroliséierbarer Fluoreszensond; den ieweschten enthält 1 μl vun 10 × Hinnen alleguer Prellbock an 1 U vun Taq Polymerase.
D'Trennung vun der Mëschung mat Paraffin erlaabt et, d'Réier fir eng laang Zäit bei enger Temperatur vu 5 ° C gelagert ze ginn an e waarme Start fir PCR ze bidden, nodeems se se fir 10 Minutte bei enger Temperatur iwwer 80 ° C erhëtzt hunn. Hinnen alleguer war no folgenden Programm gesuergt: 94.0 ° C - 90 s (1 Zyklus); 94.0 ° C - 30 s; 64.0 ° C - 15 s (5 Zyklen); 94.0 ° C - 10 s; 64.0 ° C - 15 s (45 Zyklen); 10.0 ° C - Lagerung.
Resultater an Diskussioun
D'Sequenze vum Glycerol-Triphosphat-Dehydrogenase-Gen goufen a 45 Stämme bestëmmt aus Blieder, Stengelen, Grompereknollen an Tomaten Uebst (Kutuzova, 2018) a verschiddene Regioune vu Russland. Déi studéiert Sequenzen vun alle Stämme goufen an 2 Gruppen ënnerdeelt, déi sech an zwee Nukleotiden ënnerscheeden. D'Nukleotidsequenze vu Vertrieder vu béide Gruppen ënner den Zuelen KY496634 a KY496635 ginn an d'GenBank deposéiert.
D'primers coc70gdf, coc280gdr an d'cocgdz Sond op hir Basis entwéckelt goufen iwwerpréift mam BLAST Programm (www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) op all Sequenze vum Glyceroltriphosphat-Dehydrogenase-Gen vun Aarte vun der Gattung Colletotrichum an aner Organismen, déi an der GenBank-Datebank verfügbar sinn.
Keng DNA Regiounen vun aneren Organismen héich homolog mat Primer a Sonde goufe fonnt.
D'Sensibilitéit vum Testsystem gouf iwwerpréift mat Proben mat ënnerschiddleche Konzentratioune vu C. coccodes DNA, DNA vun engem Grompereblat infizéiert mat Anthracnose (gesammelt am Joer 2017 zu Mari El, Varietéit Red Scarlett), a Schuel vu Knollen, déi vu schwaarzem Fleck betraff sinn (gesammelt an der Kostroma Regioun Varietéit Red Scarlett, Tabelle 2). Fir d'Präsenz vun DNA a Knollen a Grompereblieder ze bestätegen, goufen C. coccodes Stämme vun hinnen a reng Kulturen isoléiert.
D'Resultater vun der Empfindlechkeet Analyse vum Testsystem weisen datt et ka benotzt ginn fir d'Präsenz vu C. coccodes DNA an enger Probe erfollegräich ze diagnostizéieren wann hiren totalen Inhalt an der PCR Mëschung méi wéi 0.05 ng ass. Dëst ass ganz genuch fir d'Detektioun, well eng Sklerotie enthält am Duerchschnëtt 0.131 NG, an eng Spore enthält ongeféier 0.04 NG DNA (Cullen et al., 2002). Den Testsystem entwéckelt vun der englescher Grupp (Cullen et al., 2002) huet eng ähnlech Empfindlechkeet gewisen (Schwellzyklus 34 bei 0.05 NG DNA a 37 bei 0.005 NG).
Analyse vun natierlechen Echantillon mat C. coccodes an alle Fäll huet et méiglech seng Zouverlässegkeet an der Probe zouverlässeg opzeweisen (Tabelle 2). Déi proposéiert Method fir DNA Isolatioun war och uwendbar fir d'Analyse vun natierleche Planzeproben.
Table 2. Bestëmmung vun der Empfindlechkeet vum proposéierten Testsystem fir d'Identifikatioun vu Colletotrichum Kockelkode fir Echtzäit Hinnen alleguer
Erënnerung | De Betrag vun der DNA an der Probe *, NG | Drempel Zyklus | C. coccodes Detektioun |
---|---|---|---|
Mycelium Colletotrichum coccodes | 50 | 21.3 | + |
5 | 25.7 | + | |
0.5 | 29,7 | + | |
0.05 | 33.5 | + | |
0.005 | 40 | - | |
0.0005 | 42.8 | - | |
0.00005 | - | ||
Knollschuel 1 | 50 | 32 | + |
Knollschuel 2 | 50 | 30 | + |
Knollschuel 3 | 50 | 31.5 | + |
Grompereblat | 50 | 29.5 | + |
Notiz. * An enger Mëschung aus PCR Produkter.
D'Spezifizitéit vum Test System gouf iwwerpréift op DNA Proben, déi aus 15 Arte vu Pilze extrahéiert goufen. All Stämme vu Pilze goufen vun den Autoren aus betraffenen a gesonden Uebst a Blieder vun Tomate, Grompereknollen isoléiert; eent Deformatioun war aus Weess root (Table 1) isoléiert. Ënnert den Aarte isoléiert vun der Uewerfläch vun der Fruucht ginn et och Arten déi net pathogen fir Tomaten sinn (zum Beispill Phellinus ferrugineovelutinus).
Studien hu gewisen datt C. coccodes DNA bei engem Schwellzyklus vun 20-27 festgestallt gouf, wärend aner Pilzarten net festgestallt goufen oder e Signal nom Zyklus 40 ginn hunn, wat engem net spezifesche Geräischeffekt (Table 3) attributéiert ka ginn.
Dësch 3. Testen den Test System fir verschidden Zorten vu Champignonen
Champignon Numm | Drempel Zyklus |
Colletotrichum coccodes 1 | 20.9 |
C. Kokosnoten 2 | 22.6 |
C. Kokosnoten 3 | 23 |
C. Kokosnoten 4 | 22 |
Fusarium oxysporum | > 40 |
F. verticalillium | > 40 |
Rhizoctonia solani | > 40 |
Phomopsis Phaseoli | > 40 |
Alternaria alternata | > 40 |
A. Tomatophila | > 40 |
Helminthosporium solani | > 40 |
Phellinus ferrugineovelutinus | > 40 |
Stemphylium vesicarium | > 40 |
Ilyonectria crassa | > 40 |
Cladosporium cladosporioides | > 40 |
C. fulvum | > 40 |
Acrodontium luzulae | > 40 |
Penicillium SP. | > 40 |
Notiz. * De Betrag vun DNA an all Proben war 10 ng.
D'entwéckelt Test System gouf benotzt C. coccodes an Tomate Leaf Echantillon mat Symptomer vun necrotrophic pathogens an Some Gromper tubers ouni siichtbar Symptomer ze identifizéieren. Fir d'Etude hu mir Somknollen aus verschiddene Varietéiten an de Kostroma, Moskau, Kaluga, Nizhny Novgorod Regiounen geholl. D'Präsenz vu C. coccodes DNA gouf an de Proben als bedeitend ugesinn, an der Analyse vun där de Schwellzyklus net méi wéi 35 war. Dëse Seuilwäert gouf ausgewielt op Basis vun der zouverléisseg Determinatioun vun 0.05 ng vun C. coccodes DNA (Schwellzyklus 33.5, Tabelle 2) an der Tatsaach datt bei Schwellzyklen iwwer 40 gouf net spezifesch DNA vun e puer anere Pilzarten diagnostizéiert. Mat dëser Approche gouf eng bedeitend Präsenz vu C. coccodes DNA a 5 Proben vu Knollen entdeckt, déi an de Kostroma, Moskau, Kaluga Regiounen an an engem Tomateblat aus dem Yeisk Bezierk vun der Krasnodar Regioun gewuess sinn (Dëscher 4, 5).
Dësch 4. Detektioun vu Colletotrichum Coccoden op Grompereknollen *
Beispill Zuel | Diversitéit vu Gromperen | Plaz vum Wuesstem | C. coccodes Detektioun | Drempel Zyklus |
---|---|---|---|---|
1 | Roude Scharlachroute | Kostroma Regioun | + | 35 |
2 | + | 35 | ||
3 | - | 38 | ||
4 | Sante | Moskau Regioun | + | 34 |
5 | - | |||
6 | - | 41 | ||
7 | - | 41.8 | ||
8 | + | 30 | ||
9 | Zhukovsky fréi | Moskau Regioun | - | 40.5 |
10 | - | 40.6 | ||
11 | - | |||
12 | Molly | Kaluga Regioun | + | 34.3 |
13 | - | 38.4 | ||
14 | Fantasy | Kaluga Regioun | - | |
15 | Gala | Nizhny Novgorod Regioun. | - | |
16 | - |
Notiz. * De Betrag vun DNA an all Proben war 50 ng.
Dësch 5. Detektioun vu Colletotrichum Coccoden op Tomateblieder *
Beispill Zuel | Plaz vum Wuesstem | C. coccodes Detektioun | Drempel Zyklus |
---|---|---|---|
1 | Krasnodar Territoire, Krim Distrikt | - | |
2 | - | ||
3 | - | ||
4 | - | 45 | |
5 | - | ||
6 | - | ||
7 | - | ||
8 | - | ||
9 | Krasnodar Regioun, Distrikt Yeisk | - | 39.2 |
10 | - | 40.8 | |
11 | - | ||
12 | - | 41.6 | |
13 | - | 40 | |
14 | - | 41 | |
15 | - | 41.9 | |
16 | - | ||
17 | - | ||
18 | - | 40.3 | |
19 | - | ||
20 | - | ||
21 | + | 34.5 | |
22 | - | ||
23 | - |
* De Betrag vun DNA an all Proben war 50 ng.
Den Testsystem vun eis erstallt ass net manner wéi dee vu britesche Fuerscher (Cullen et al., 2002) a Sensibilitéit a Spezifizitéit entwéckelt an ass gëeegent fir d'Analyse vu Planzeproben. Seng Uwendung fir d'Analyse vu Somknollen huet et méiglech gemaach C. coccodes DNA a Knollen z'identifizéieren ouni extern Zeeche vu Schued an d'Infektioun vu Blieder erfollegräich ze analyséieren.
Bis haut gouf a Russland keng Analyse vu Grompereknollen fir d'Beleidegung vu C. coccodes gemaach. Eis éischt Studie huet gewisen, datt aus 16 getestene Somknollen, déi a verschiddene Regioune vun der Russescher Federatioun gewuess sinn, 5 C-Kodes enthält. Dëst weist datt schwaarze Fleck vu Grompereknollen eng heefeg Gromperekrankheet a Russland ass, a seng Roll bei der Reduktioun vum Volume an der Qualitéit vun der Gromperekultur gëtt ënnerschat.
Analyse vun Tomateblieder huet eng bedeitend Präsenz vu C. coccodes DNA an engem Blat aus dem Yeisk Distrikt vum Krasnodar Territory opgedeckt. Virdru beim Tomatenfelder am Süde vu Russland mam briteschen Testsystem (Cullen et al., 2002) goufen d'Blieder mat C. coccodes identifizéiert, an a verschiddene Beräicher gouf en héijen Undeel u Blieder infizéiert mat C. coccodes fonnt (Belov et al., 2018). An de Krasnodar a Primorsky Territorien, der Moskau Regioun, hu mir Tomaten Uebst fonnt, aus deenen mir et fäerdeg bruecht hunn, reng Kulturen vun C. coccodes ze isoléieren. Et ass méiglech datt C. Coccodes vill méi verbreet sinn op Tomaten a Russland wéi elo gegleeft gëtt, a seng Schiedlechkeet gëtt och ënnerschat.
Also, bis haut ass genuch Informatioun iwwer d'verbreedung vu C. Coccodes op Kartoffel an Tomaten accumuléiert.
Fir d'Roll vun dësem Pilz an der Entwécklung vu Kartoffel- an Tomatekrankheete besser ze verstoen, ass et néideg seng Prävalenz a Russland ze iwwerwaachen, d'Roll vu Buedem- a Sauminfektiounen ze studéieren, an d'Roll vum schwaarze Fleck bei Verloschter beim Lagerung. D'Benotzung vu PCR Diagnostik kann dës Aarbecht erheblech erliichteren, an d'simultan Notzung vu béiden Testsystemer wäert d'Genauegkeet vun der Analyse wesentlech erhéijen.
Dës Aarbecht gouf ënnerstëtzt vun enger Subventioun vun der Russescher Science Foundation Nr. 18-76-00009.
Den Artikel gouf an der Zäitschrëft "Mykologie a Phytopathologie" (Band 54, Nr. 1, 2020) verëffentlecht.